科锐诺-染色体原位杂交测试服务

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    2024-6-7

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武汉科锐诺生物科技有限公司提供科锐诺-染色体原位杂交测试服务。













tunel流式细胞凋亡检测服务通常称为细胞程序性死1亡,是由基因控制的主动性细胞死1亡过程。越来越多数据发现,细胞凋亡与多种---密切相关,如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力,利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿1瘤诊断,疗1效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

  tunel(tdt-mediated dutp nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核dna的断裂情况,其原理是生物素biotinylate标记的dutp在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(tdt enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂dna的3’-oh末端,并与连接辣根---化酶(hrp,horse-radish peroxidase)的链霉亲和素streptavidin特---结合,后者又与pod底物h2o2、二氨1基联1---1胺(dab)产生深棕色反应,特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即---察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有dna断裂,因而没有3‘-oh形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿1瘤药的药1效评价,以及通过双色法确定细胞类型和分化阶段。




分子病理学是与分子生物学、细胞遗传学等学科相互渗透,在蛋白质和---等生物大分子水平上研究---病因、发病机制、形态变化及功能损害等方面发生和发展规律的新的分支学科,对---的病因、发展、发病机制及形态变化,染色体原位杂交测试服务,从传统形态学概念深入至分子或基因水平,分子病理已成为肿1瘤病理研究中重要的内容和手段。细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;





原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的pbst溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的pbst溶液,放置5分钟

3) 置换成pbst溶液,放置5分钟,重复一次

4) 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2) 用pbst溶液轻洗,在pbst中放置5分钟。

3) 用4%---的pbs溶液固定20分钟,室温。

4) 用pbst洗两次,每次放置五分钟,室温。

2. 预杂交

1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的hyb+取代hyb-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

3. 杂交

1)吸去预杂交的hyb+,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。






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