植物原位杂交-武汉科锐诺生物

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    2024-5-15

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荧光原位杂交技(fish)原理:是利用荧光标记的特异---探针与细胞内相应的靶dna分子或rna分子杂交,通过在荧光显微镜或共---激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的dna区域或rna分子在染色体或其他细胞器中的定位。

       荧光原位杂交技(fish)实验步骤:

       1、组织固定:组织取出洗净后立即放入固定液(depc水配制)中固定2-12h。

       2、脱水:组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡,包埋。

       3、切片:石蜡经切片机切片,摊片机捞片,62°烤箱烤片2h。

       4、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲1---ⅰ 15min-二甲1---ⅱ 15min-无水---ⅰ 5min-无水---ⅱ 5min,风干,depc水浸泡。

       5、---:根据组织固定时间长短,切片于修复液中煮沸10分钟,自然冷却。后基因笔画圈,根据不同组织不同指标特性,滴加蛋白酶k(20ug/ml) 37°---20min。纯水冲洗后pbs洗3次×5min。








原位末端凋亡检测(tunel)

实验原理: tunel技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性---内切酶被而将自身染色体dna切断成缺口或3-oh末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-oh末端,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。






分子病理学在蛋白质和---等生物大分子水平上,应用分子生物学理论、技术及方法研究---发生l发展的过程,植物原位杂交,从而为传统的病理学注入了生机。在如今的---病理诊断过程中,运用---原位杂交、pcr技术、免1疫荧光、免1疫组织化学染色等技术,能够深化对---的本质认识,对于肿1瘤的诊断和治1疗也有着---的指导意义。分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿1瘤---的检测,对于肿1瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿1瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。




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