科锐诺生物科技-染色体原位杂交检测技术服务

荧光原位杂交技（fish）原理：是利用荧光标记的特异---探针与细胞内相应的靶dna分子或rna分子杂交，通过在荧光显微镜或共---激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的dna区域或rna分子在染色体或其他细胞器中的定位。

       荧光原位杂交技（fish）实验步骤：

       1、组织固定：组织取出洗净后立即放入固定液（depc水配制）中固定2-12h。

       2、脱水：组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡，包埋。

       3、切片：石蜡经切片机切片，摊片机捞片，62°烤箱烤片2h。

       4、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲1---ⅰ 15min-二甲1---ⅱ 15min-无水---ⅰ 5min-无水---ⅱ 5min，风干，depc水浸泡。

       5、---：根据组织固定时间长短，切片于修复液中煮沸10分钟，自然冷却。后基因笔画圈，根据不同组织不同指标特性，滴加蛋白酶k(20ug/ml) 37°---20min。纯水冲洗后pbs洗3次×5min。

染色体发现距今已有150多年的历史，染色体检测被广泛用于动、植物及人类的细胞遗传学研究，随着染色体分技术和分子生物学技术的发展。染色体研究范围也不断扩大，---是用于肿1瘤分子诊断。肿1瘤细胞的染色体变化是一非常普遍的现象，可分为原发和继发两类。在肿1瘤形成的生物学基础方面，原发性的染色体变化与引起肿1瘤的直接原因有关，肿1瘤细胞中可以发现各种形式的染色体畸变，如缺失、重复、易位、重排、单体断裂及核内复1制等；继发性变化主要是肿1瘤细胞核型的改变。染色体的检测对于肿1瘤的诊断、鉴别诊断、生物学行为判别等方面都重要意义。染色体的检测方法进展很快，检测的精1确率也不断提高，

水稻种子是人类重要的食物来源，其发育涉及一个复杂的调控网络，其中转录因子发挥了关键作用。mads转录因子家族成员是植物花器1官发育的重要调控因子，已有的研究表明，染色体原位杂交检测技术服务，几乎所有的水稻mads基因都在种子中表达，但对mads家族成员参与水稻种子发育调控的研究结果仍比较少。

在这项研究中，研究组基于前期的表达谱研究基础，分析得到了一个在水稻生殖发育阶段优先表达的转录因子mads29。细致分析表明，mads29在花药、胚珠和种子中均表达，且在受精后的母体组织表达量高。mads29的反义转1基因植株呈现种子皱缩、淀粉粒形态异常、灌浆速率下降等表型。通过解剖学切片、末端转移酶标记实验和全基因组表达谱芯片分析等，研究人---明了mads29通过调控程序化死1亡(pcd)过程促进珠心细胞和珠心突起处的降解。进一步的体外凝胶阻滞实验显示，mads29能够通过直接结合程序化死1亡相关基因的启动子区域而调控其表达，进而影响胚乳发育。

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