





外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,外泌体质谱检测,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,外泌体质谱,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。

nta可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,外泌体质谱检测服务,但不能够以nta所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解nta检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过nta所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。

透射电镜作为鉴定外泌体的金标准,一直是科锐诺生物主营的业务之一。透射电镜点分辨率可以达到0.1nm,非常适合用来观察外泌体类囊泡。客户只需要寄送新鲜或者冻存的外泌体样品,我们负责从制片到观察的全套检测服务。一个样品提供2个放大倍数,10-15张照片。检测周期为7个工作日。
在透射电镜基础上,用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点,同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得---形态的外泌体,又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。
外泌体质谱服务-外泌体质谱-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司实力---,信誉---,在湖北 武汉 的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。科锐诺带着精益---的工作态度和不断的完善---理念和您携手步入,共创美好未来!
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