





原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交,使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。
原位杂交技术的基本原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有放1射性或非放1射性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物
阻断内源性---化物酶:滴加3%1甲1醇-h2o2,室温避光孵育15min,将玻片置于pbs(ph7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
预杂交:滴加预杂交液,37°c孵育1h。
杂交:倾去预杂交液,滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液,浓度6ng/ul,恒温箱37度杂交过夜。
杂交后洗涤:洗去杂交液,2×ssc,37°c 洗10min,1×ssc,37°c洗2×5min,tunel技术服务,0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多,可以增加---胺洗涤。
滴加封闭液:滴加封闭血1清(正常兔血1清),室温30min。
滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶(anti-dig-hrp):倾去封闭液,滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min,后pbs洗3次×5min。
分子病理学是20世纪70年代初,随着---的细胞生物学和分子生物学的发展和相互渗透的一个病理学分支学科。分子病理学是应用分子生物学理论、技术和方法,研究---发生1发展过程中蛋白质和---水平变化对---发生过程的影响及其作用,探讨---发生的分子机制,揭示---本质的现代病理学的分支学科。深入进行---分子病理学研究,将为---的精1准诊断和精1准治1疗提供重要的科学依据。

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