植物组织原位杂交测试服务-科锐诺生物科技

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    2023-11-17

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阻断内源性---化物酶:滴加3%1甲1醇-h2o2,室温避光孵育15min,将玻片置于pbs(ph7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。

预杂交:滴加预杂交液,37°c孵育1h。

杂交:倾去预杂交液,滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液,浓度6ng/ul,恒温箱37度杂交过夜。

杂交后洗涤:洗去杂交液,2×ssc,37°c 洗10min,1×ssc,37°c洗2×5min,0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多,可以增加---胺洗涤。

滴加封闭液:滴加封闭血1清(正常兔血1清),室温30min。

滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶(anti-dig-hrp):倾去封闭液,滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min,后pbs洗3次×5min。

     




原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交,使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。

       原位杂交技术的基本原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有放1射性或非放1射性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,植物组织原位杂交测试服务,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物

     



分子病理诊断在遗传性---的诊断和分型方面---特长,通过对---染色体、基因的检测进行遗传病---和诊断,并可对家族遗传病的发生进行预测。目前,国内主要通过染色体核型分析、荧光原位杂交技术、荧光定量pcr技术等检测染色体畸形,辅助进行产前遗传性---的---。通过dna直接测序、荧光定量pcr、免1疫组化技术等检测相关基因的结构、表达的变化,辅助进行神经系统、生殖系统等遗传性---的诊断。




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