外泌体测序检测-科锐诺生物科技

样本准备

1. 提供外泌体悬液即可，未纯化样本也可以上机检测；

注意：nta仅提供粒径分布情况和颗粒浓度，无法区分外泌体与非外泌体成分；当然也可先利用外泌体特---标记物进行荧光标记，则可以获知外泌体特定亚群的含量。

2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml，且有浓度检测下限，外泌体测序检测，为10^5 particles/ml，进样量不少于2ml；一般来说，会对样本稀释后进样；

我司无法准确建议送样量；检测需要量与样本本身浓度有关，样本浓，则用量小，反之则多，根据检测经验，样本取用量一般在2μl-100μl不等，取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl，如样本珍贵，可联系我司寄回，运费视具体情况收取。

抗原提呈中外泌体的作用

树突状细胞是免1疫系统中分泌外泌体活跃的细胞。树突状细胞是抗原提呈细胞的一种，能通过吞噬入1侵体内的---等异物，在切断抗原肽后，与 mhcⅱ类分子结合并提呈在细胞表面来激1活t细胞。细胞内的抗原肽利用mhcⅰ类分子提呈，树突状细胞分泌的外泌体携带mhcⅰ类和ⅱ类分子，它们分别与抗原特---cd8+ 细胞---性t细胞、cd4+ 辅助t细胞的t细胞受体结合，在远离树突状细胞处也可以激1活t细胞。

itraq (isobarictags for relative&absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由ab sciex公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将itraq标签与肽段的n-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可---itraq试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一itraq试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。




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