染色体原位杂交技术服务-科锐诺生物科技

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    2023-4-16

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杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。

把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加x片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。

底片显---,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。



原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交,染色体原位杂交技术服务,使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。

       原位杂交技术的基本原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有放1射性或非放1射性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物

     


分子病理学在蛋白质和---等生物大分子水平上,应用分子生物学理论、技术及方法研究---发生l发展的过程,从而为传统的病理学注入了生机。在如今的---病理诊断过程中,运用---原位杂交、pcr技术、免1疫荧光、免1疫组织化学染色等技术,能够深化对---的本质认识,对于肿1瘤的诊断和治1疗也有着---的指导意义。分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿1瘤---的检测,对于肿1瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿1瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。



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